一、 设备名称:荧光光谱仪
规格型号:日立F-7000
二、各项具体技术参数:
不同物质由于分子结构的不同,其激发态能级的分布具有各自不同的特征,各种物质都有其特征荧光激发和发射光谱,因此利用荧光化合物的该特征来进行物质的定性鉴定。
1. (拉曼光水) 噪音:背景 S/N 15,000 以上*1
噪音:峰 800 以上*2
2. 最小样品量 0.6 mL(使用标准10 mm荧光池)
3. 光度类型 单色光比例控制
4. 光源 150 W氙灯,自动除臭氧
5. 波长测定范围 (激发波长和发射波长) 200至750 nm,且为零阶光
6. 波长扫描速度 30、60、 240、1,200、2,400、12,000、30,000、60,000 nm/min
7. 外形尺寸/重量 分光光度计:620(W) × 520(D) × 300(H) mm(不包括突出部分)/41 kg
8. 工作温度/湿度 温度:15 - 35°C
9. 湿度:45 - 80%(不得有冷凝水。温度为35度或以上时,湿度低于70%)
三、工作原理:
图1 主要原理和构造示意图
由光源(高压汞灯或氙灯)发出的紫外光和蓝紫光经单色器(滤光片)处理后特定波长的光照射到样品池中,激发样品中的荧光物质而发出荧光,荧光经过滤过和反射后,光信号被光电倍增管放大后,然后以图或数字的形式在控制软件上显示出来。不同物质由于分子结构的不同,其激发态能级的分布具有各自不同的特征,各种物质都有其特征荧光激发和发射光谱,因此可以用荧光化合物的该特征来进行物质的定性鉴定。
四、应用领域
目前,荧光分光光度法在各个领域内得到广泛应用:诸如有机电致发光和液晶等工业材料;水质分析等环境相关领域;荧光试剂的合成与开发等制药领域;细胞内钙离子浓度测定等生物技术相关领域。
五、可开展实验项目
1.Wavelength scan
2.Time Scan:
3.Photometry:
4.3-D Scan:
六、可培训技能
1、针对光催化领域的基础表征及分析
七、具体操作规程
1、开机
开机:先开操作电脑,再开启主机电源(仪器主机左侧面板下方的黑色按钮(POWER))。同时,注意观察Xe LAMP和RUN指示灯(主机正面面板右侧)依次点亮,都显示绿色。
2、准备:
(1)双击桌面FL Solution 2.1 for F-7000图标,待主机完成初始化后,自动进入扫描界面。(2)初始化完成后,仪器须预热15~20分钟。
3、参数设置:
点击右侧Method图标,出现操作选项界面。
4、操作规范
Wavelength scan:已知荧光物质最适激发波长和发射波长的情况下测荧光物质荧光强度,如不同溶剂环境对荧光物质荧光强度的影响或者猝灭剂对荧光物质荧光猝灭作用
Time Scan:测荧光强度随时间的变化
Photometry:光度测定,定量实验
3-D Scan:未知荧光物质最适激发波长和发射波长,通过测三维荧光,可得最适激发波长和最适发射波长
5、主要参数选项包括:
选择扫描模式“Scan Mode”:发射光谱、激发光谱和同步荧光
选择数据模式“Data Mode”:荧光测量、磷光测量、化学发光。
设定波长扫描范围。
A、扫描荧光激发光谱(Excitation):设置最适激发波长
B、扫描荧光发射光谱(Emission):设置发射波长范围
(包含最适发射波长)!!
Attention:激发光终止与起始波长差不小于20nm。
选择仪器响应时间“Response”(一般选Auto)。
选择光闸控制“Shutter Control”打√,以使仪器在光谱扫描时自动开启,而其他时间关闭。
选择“Report”设定输出数据信息、仪器采集数据的步长(通常选0.2nm)及输出数据的起始和终止波长(Data Start/End)。
6、文件保存
点击“Sample”,出现以下界面,设置好文件名、储存路径后点击“OK”。
八、安全注意事项
1. 注意开机顺序。
2. 注意关机顺序。
3. 为延长仪器使用寿命,扫描速度、负高压、狭缝的设置一般选在高档。
4. 关机后必须半小时以上(等氙灯温度降下)方可重新开机。